Діареєгенні ешерихіози (EPEC, ETEC, EIEC, EHEC, EAgEC), якісне визначення ДНК методом ПЛР

Ешеріхіози - група бактеріальних антропонозних інфекційних хвороб, що викликаються патогенними (діареєгенними) штамами кишкової палички, що протікають з симптомами загальної інтоксикації та ураженням ШКТ. Ешеріхії - рухливі грамнегативні палички, аероби, що належать до виду Еscherichia coli, роду Escherichia, сімейства Enterobacteriaceae.

Ентеропатогенні ешерихії (EPEC) – збудники коліентеритів у дітей раннього віку (перших 2-х років життя). Ця група, як правило, не є небезпечною для дорослих. Виділення у дітей до 1 року EPEC вказує на їхню етіологічну роль, а у дітей віком від 1 року до 2 років можливе носійство. При спалахах, спричинених EPEC, джерелом найчастіше є дорослі носії. Ентеротоксигенні ешеріхії (ETEC) – збудники холероподібних захворювань. Ці ешерихії здатні викликати захворювання 4 типів у всіх вікових групах: гастроентерити дітей молодшого віку, "діарею мандрівників", діарею військовослужбовців під час бойових дій у районах зі спекотним кліматом, гастроентерити (на кшталт харчових токсикоінфекцій).   Ентероінвазивні ешерихії (EIEC) викликають дизентерієподібні захворювання у дітей та дорослих.   Ентерогеморагічні ешерихії (ЕНЕС) – збудники гострих кишкових інфекцій з проявами геморагічного коліту та гемолітико-уремічного синдрому. Штами ЄНЕС становлять серйозну загрозу життю особливо для людей похилого віку та дітей до 5 років. Основними клінічними симптомами є гострі абдомінальні болі, діареї, часто з кров'ю (геморагічний коліт), блювання, нудота, підвищена температура. Ентероагрегативні ешеріхії (EAgEC) – збудники банальних діарей. Інкубаційний період становить від 9 годин до 10 днів, частіше близько 3-х днів.  

 Метод ПЛР дозволяє виявити у біологічному матеріалі (у калі) фрагменти генетичного матеріалу збудника інфекції. ПЛР характеризується дуже високою чутливістю (93-95%).

Кал

Перед здачею досліджень необхідно узгодити з лікуючим лікарем прийом і скасування  препаратів.
При контролі лабораторних показників у динаміці рекомендується проводити лабораторні дослідження за однакових умов: здавати кал в одній лабораторії, в однаковий час доби, тощо.
Про прийом лікарських препаратів необхідно повідомити співробітників у відділенні.
Дане дослідження оформлюється тільки з приносного біоматеріалу.

Правила взяття біологічного матеріалу

• Для дослідження збирають свіжевиділений кал. Перед збором необхідно помочитись (для виключення можливості потрапляння сечі у фекальні маси).
• При зборі біоматеріалу необхідно уникати контамінації біологічного матеріалу сторонньою мікрофлорою (ретельно мити руки до взяття, використовувати тільки стерильні витратні матеріали та ін.).
• Кал збирається в стерильний одноразовий контейнер спеціальною ложечкою в кількості не менше 50г (обсяг від чайної до столової ложки) і не більше, ніж 1/3 об'єму стерильної ємності (якщо при зборі матеріалу використовують судно, то його попередньо необхідно обробити дез.засобом, а після обробити окропом, щоб видалити сліди дез.засоба).
• На дослідження набираеться середня порція калових мас. Перша порція, або калова пробка, на дослідження не набирається.
  

Для немовлят:

• Допустимо проводити відбір матеріалу з середньої частини фекальних мас ложкою, не торкаючись памперса.
• Нeвелику частину 1.0-3.0 г (1.0-3.0 мл) збирають з 7-10 різних місць ложечкою контейнера або іншим стерильним предметом.
• Заборонено використовувати ректальні свічки. 

Перед збором матеріалу необхідно:

За 1-3 дні до взяття матеріалу виключити з раціону прийом продуктів, що підсилюють процеси бродіння у кишечнику, молочнокислі продукти, алкоголь. 

Не слід здавати:

• Кал, отриманий після клізми, а також після прийому барію (при рентгенологічному обстеженні).
• Жінкам не рекомендується здавати аналіз калу під час менструації. 

За 3-4 дні до дослідження рекомендовано скасувати:

• прийом проносних препаратів, касторового і вазелінового масла;
• припинити введення ректальних свічок;
• виключити прийом препаратів, які можуть забарвлювати кал (залізо, вісмут);
• виключити прийом препаратів, які посилюють перистальтику кишечника.
  

Взяття матеріалу здійснюється до початку антибактеріального і антимікробного лікування (загального і місцевого значення), або через 2-3 тижні після відміни цих препаратів.
Важливо! Скасування або прийом лікарських препаратів обговорюється з лікарем в кожному індивідуальному випадку. 

Спеціальні умови зберігання біологічного матеріалу:

• Для Одеси – біологічний матеріал, набраний у стерильну ємність, необхідно доставити у відділення лабораторії протягом 1-2 годин після дефекації. При неможливості доставити матеріал протягом цього часу до відділень м.Одеси, транспортний контейнер необхідно зберігати в холодильнику при температурі +2…+8°С, але не більше 10-12 годин.
• Для інших міст необхідно доставити ранковий кал, набраний у стерильну ємність, протягом 1-2 годин після дефекації.
  

Транспортний контейнер - стерільний пластиковий стаканчик з ложкою і кришкою. на контейнері необхідно вказати ПІБ пацієнта, а також дату і час збору матеріалу.
Неприпустимо приносити кал на дослідження в сірникових або картонних коробках, так як при цьому змінюються форма і консистенція калу, що впливає на результати аналізу. 

АНАЛІЗАТОР:

РЕФЕРЕНСИ:

ПРИ ЗНИЖЕННІ:

відсутність збудника діареєгенних ешеріхіозів (EPEC, ETEC, EIEC, EHEC, EAgEC) у біоматеріалі. 

ПРИ ПІДВИЩЕННІ:

наявність збудника діареєгенних ешеріхіозів (EPEC, ETEC, EIEC, EHEC, EAgEC) у біоматеріалі. 

ІНТЕРФЕРЕНЦІЯ

ПІДВИЩЕННЯ:

ЗНИЖЕННЯ:

показання до призначення:

• встановлення етіологічного фактора гострої кишкової інфекції;
• диференціальна діагностика причин гострого гастроентероколіту.